Tampé

Cellular Logistics - 'Traceless' protein modification by small high-affinity tags in living cells

Die Markierung und Modifikation von intrazellulären Proteinen stellt eine besondere Herausforderung dar. Meistens werden hierfür große Fusionsdomänen, große Mengen an teuren Reagenzien und längere Reaktionszeiten benötigt. Innerhalb dieses Antrages werden wir hochgeladene Proteine mit Licht-abspaltbaren Affinitätstags entwickeln, die es ermöglichen, verschiedene Sonden nicht nur in die Zellen einzubringen, sondern auch lichtinduziert auf andere Proteinkomplexe zu transferieren. Darüber hinaus wollen wir das Protein-trans-Spleißen über sehr kleine, hoch affine Interaktionspaare gezielt steuern und somit die Effizienz dieser Ligationstechnik für in vitro und in vivo Anwendungen signifikant erhöhen.

Diese neuen „spurlosen“ Proteinmodifikationsansätze werden in Verbindung mit hochauflösender Mikroskopie und Einzelmolekültechniken wichtige Einblicke in die konformationelle Dynamik, die Interaktion und den Transport von Proteinkomplexen, insbesondere in intrazellulären Membranen liefern.

Prof. Dr. Robert Tampé
Goethe-Universität Frankfurt am Main

Tel.: +49 69 798 29475
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Publications within the SPP 1623 project

A. Kollmannsperger, A. Sharei, A. Raulf, M. Heilemann, R. Langer, K.F. Jensen, R. Wieneke, R. Tampé
Nature Commun. 2015, accepted
Live-cell protein labelling with nanometre precision by cell squeezing
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M. Braner, A. Kollmannsperger, R. Wieneke, R. Tampé
Chem.Sci. 2015, accepted
'Traceless' tracing of proteins - high-affinity transsplicing directed by a minimal interaction pair.
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R. Wieneke, A. Raulf, A. Kollmannsperger, M. Heilemann, R. Tampé
Angew. Chem. Int. Ed. 2015, accepted
SLAP: Small Labeling Pair for Single-Molecule Super-Resolution Imaging

R. Wieneke, N. Labòria, M. Rajan, A. Kollmannsperger, F. Natale, M.C. Cardoso, R. Tampé
J. Am. Chem. Soc. 2014, 136, 13975-13978
Live-cell Targeting of His-tagged Proteins by Multivalent N-Nitrilotriacetic Acid Carrier Complexe
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V. Gatterdam, R. Ramadass, T. Stoess, M.A.H. Fichte, J. Wachtveitl, A. Heckel, R. Tampé
Angew. Chem. Int. Ed.2014, 53(22) 5680-5684
Three-dimensional protein networks guided by two-photon activation
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N. Labòria, R. Wieneke, R. Tampé
Angew. Chem. Int. Ed. 2013, 52, 848-853
Control of Nanomolar Interaction and In Situ Assembly of Proteins in Four Dimensions by Light